实验室核酸染料的筛选

琼脂糖凝胶电泳最早使用的核酸染料溴化乙啶(EB)，因其被证实具有高度致癌性和致突变性，已在多数实验室停止使用。当前，实验室使用较多的是GelRed和GoldView两种核酸染料。核酸染料的安全性与其渗透细胞膜能力有一定相关性，GelRed穿透性弱，安全性相对较高，其水溶剂废弃物可直接排入下水道，不会对环境造成污染；从极为相似的对比试验结果来看，市面上出现的“无毒核酸染料”GoldView被推测是剧毒产品吖啶橙类，其穿透细胞膜能力较强，具有一定的致突变性，对皮肤和眼睛也有一定刺激性。本研究采用胶染法对比GelRed和GoldView两种染色剂，检测其染色效果、灵敏性和使用剂量、琼脂糖凝胶的背景色等，以筛选安全环保和浓度适宜的染色剂。
 
结果表明，2种新型核酸染料中GoldView电泳背景噪性相对较高，这与杨萍等[2]的研究结果相一致。在25～50 ng范围内，随着DL5000和DL2000DNA Marker上样量的增加，电泳条带的亮度增大，继续增大上样量，亮度变化不大。综合两种核酸染料的安全性，推荐使用1%琼脂糖凝胶添加50 ng的GelRed核酸染料。生物类实验室中开展的实验内容非常丰富，可在其他实验中进行有毒有害试剂的减害化探索。此外，在不影响实验结果的前提下，实验过程中还可将实验体系的常规量减半或改为微量，这样既能节约化学试剂、减少废弃物，又能确保安全环保